ВЛИЯНИЕ
АНТИОКСИДАНТА «ТИОФАН-М» НА СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ ОРГАНИЗАЦИЮ ПЛАСТИНКИ
РОСТА ТЕЛА ПОЗВОНКА КРЫС
О.А.
Наумова, А.Ф. Нецветаева, А.В. Гофман Научный руководитель: канд. биол. наук,
доц. А.А. Макеев ФГБОУ ВПО «Новосибирский государственный педагогический
университет»
В условиях глюкокортикоид-индуцированного
окислительного стресса изучен хондропротекторный эффект серосодержащего
полифункционального анти- оксиданта «Тиофан-М». Использование антиоксиданта
«Тиофан-М» в условиях окислительного стресса сни- жает показатели
липопероксидации и оказывает про- тективный эффект на клетки и матрикс
пластинки роста тела позвонка. Цель исследования – изучить хондропротектор- ный
эффект антиоксиданта «Тиофан-М» на эксперимен- тальной модели окислительного
стресса. Экспериментальная часть работы выполнена на самцах крыс линии Вистар.
Согласно протоколу экспе- римента было сформировано 3 группы животных – кон-
трольная и две опытные по 20 крыс в каждой. У крыс опытных групп, моделировали
развитие окислительного стресса, путем введения преднизолона (per os) в дозе 50
мг/кг в течение 14 суток. Животных первой опытной группы не лечили, крысам
второй опытной группы за 3 часа до введения преднизолона получали антиоксидант
«Тиофан-М» в дозе 100 мг/кг. Контрольные животные 182 содержались в стандартных
условиях вивария и специ- альных манипуляций с ними не проводилось. На 15-е сутки
всех животных под эфирным наркозом выводили из эксперимента. Объектом иссле-
дования являлась плазма крови и фрагменты грудного отдела тела позвонка. В
плазме крови определяли содержание продук- тов сободнорадикального окисления –
малонового диальдегида и диеновых конъюгатов, а также актив- ность ферментов
антиоксидантной защиты – каталазы и супероксиддисмутазы. Фрагменты тел
позвонков фиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина, декальцинировали
и после обезвоживания в Isoprep заливали гистомиксом. На ротационном
полуавтоматическом микротоме SLEE CUT 5062 (Германия) изготавливали серийные
срезы толщиной 3-4 мкм. Для изучения общей морфологиче- ской картины срезы
окрашивали гематоксилином и эозином. Кислые гликозаминогликаны (ГАГ) выявляли
альциановым синим по Стидмену. Экспрессию белков гена р-53 и вcl-2 определяли
методом иммуногистохи- мического анализа в реакции с вторичными антителами.
Анализ биохимических показателей в плазме крови крыс 1-ой опытной группы
свидетельствует, что содержание интегральных показателей свободноради- кального
перекисного окисления липидов статистически достоверно превышает аналогичные
показатели крыс контрольной группы. В частности, уровень диеновых конъюгатов на
62,41%, а малонового диальдегида на 56,04% выше аналогичных значений крыс
контрольной группы. Исследование антиоксидантного статуса плаз- мы крови крыс
1-ой опытной группы позволяет отме- тить снижение активности исследуемого
ферментатив- ного звена антиоксидантной защиты. В частности, ак- 183 тивность
супероксиддисмутазы на 44,06%, а каталазы на 53,18 % ниже по сравнению с
аналогичного показа- теля крыс контрольной группы. Превышение уровня продуктов
перекисного окисления липидов и депрессия ферментов антиокси- дантной защиты в
плазме крови крыс первой опытной группы являются доказательством развития
окисли- тельного стресса при длительном применении глюко- кортикоидов. У крыс в
условиях окислительного стресса нару- шается структурно-функциональная
организация пла- стинки роста тела позвонка. Иммуногистохимически выявлялся
высокий уровень экспрессии белка р53, а маркер белка bcl-2 определялся лишь в
единичных клетках. В центральной части зоны пролиферации отме- чена инвазия
клеток и матрикса сосудистыми каналами, что приводит к деструкции хрящевого
матрикса. Колон- ковые структуры, по сравнению с контрольными образ- цами,
сужены, а в отдельных случаях не определялись. Толщина зоны гипертрофических
клеток значительно уменьшена и представлена двумя, тремя слоями клеток против
пяти, шести в норме. Применение полифункционального антиоксидан- та «Тиофан-М»,
в условиях окислительного стресса, статистически достоверно снижает показатели
свобод- норадикального перекисного окисления липидов и уве- личивает активность
ферментов антиоксидантной защи- ты. В хрящевой ткани пластинки роста тела
позвонка крыс 2-ой опытной зона пролиферирующего хряща не- значительно
расширена. Матрикс вокруг клеток проли- ферирующей зоны характеризуется
тонковолокнистым строением и гомогенно окрашивается гематоксилином. В
хондробластах данной зоны снижался уровень экс- 184 прессии апоптотического
белка р53. Однако при поста- новке реакции с альциановым синим в
территориальном и межтерриториальном матриксе определялись локаль- ные участки,
не воспринимающие краситель. Зона созревающего хряща представлена 3-4 клет-
ками. Цитоплазма клеток характеризуется неравномер- ным базофильным
окрашиванием и в ней определяются крупные, оптически прозрачные вакуоли.
Указанные признаки свидетельствуют о незначительном наруше- нии клеток и
матрикса хрящевой ткани. Таким образом, результаты проведенного иссле- дования
свидетельствуют, что антиоксидант «Тиофан- М» в условиях окислительного стресса
оказывает выра- женный хондропротекторный эффект.
Оставьте свой комментарий
Авторизуйтесь, чтобы задавать вопросы.