Российский конкурс детских научных работ
«СОВЁНОК
- исследователь»
Секция: Биология
Тема: «ЧАЙНЫЙ
ГРИБ И БЕРЕЗА:
ЧТО ОБЩЕГО?»
Автор работы: Дворников Никита Викторович
Возраст: 15 лет
Место выполнения работы: МОУ «Луховский лицей», Мордовия, г.о. Саранск
Научный руководитель: учитель биологии – Дворникова Татьяна
Александровна
2014
Актуальность
исследования
Целлюлоза – это полимер, прежде всего
растительного происхождения, продукт фотосинтеза, самый крупнотоннажный из
биополимеров. Растения образуют его в
фантастическом количестве, около триллиона тонн в год. Помимо растений,
способностью синтезировать целлюлозу обладают простейшие – слизевики, а также
некоторые животные, например низшие хордовые – асцидии. Удивительное явление – образование
бактериальной целлюлозы (БЦ). Микроорганизмы продуцируют
чистую внеклеточную целлюлозу, которая не содержит лигнина, смол, восков и не
требует отбелки. БЦ не загрязняет
окружающую среду, так как способна к биоразложению и абсолютно нетоксична. БЦ
проявляет два, казалось бы, несовместимых качества – тончайшую пористость и
механическую прочность. Благодаря своим уникальным свойствам, БЦ может
использоваться в пищевой промышленности, в производстве бумаги, в технике и
медицине как биоматериал для тканевой инженерии и создания раневых покрытий.
Наиболее известным производителем БЦ
являются уксуснокислые бактерии. Их можно обнаружить в чайном грибе. Это слоистый
коврик желтого цвета, плавающий на поверхности подслащенного чая. Вопреки
своему названию, чайный гриб – это
вовсе не особый гриб, а целлюлозная гель-пленка с включенными в нее клетками
уксуснокислых бактерий и нескольких видов дрожжей. Чайный квас известен как
прохладительный и тонизирующий напиток. Считается, что он обладает лечебным
действием.
Цель работы: получение
бактериальной целлюлозы с помощью бактерий, выделенных из чайного гриба, и
изучение их свойств.
Задачи работы:
1. Изучить состав чайного гриба и
условия его роста.
2. Изучить свойства уксуснокислых
бактерий, выделенных из чайного гриба и образующих целлюлозу.
3. Получить гель-пленки бактериальной
целлюлозы.
Теоретическая
часть
Целлюлоза
— это полимер, прежде всего, растительного происхождения, продукт фотосинтеза.
Растения образуют его в фантастическом количестве, около триллиона тонн в год.
Макромолекула целлюлозы состоит из тысяч остатков глюкозы (рис. 1), соединенных
в спирально закрученную цепь; 20–200 цепей образуют кристаллический пучок, или
микрофибриллу. Микрофибриллы собираются в лентовидные волокна, погруженные в
толщу цементирующих полимеров — лигнина, ксиланов, арабинанов, пектинов и
белков.
Рисунок 1 – Химическое
строение целлюлозы
Помимо
растений, способностью синтезировать целлюлозу обладают простейшие – слизевики,
а также некоторые животные, например низшие хордовые – асцидии. При редкой
болезни, кератодерматите, она образуется даже в организме человека.
Микроорганизмы продуцируют
внеклеточную целлюлозу, которая не содержит лигнина, смол, жиров, восков и не
требует отбелки. Бактериальная целлюлоза не загрязняет окружающую среду, так
как способна к биоразложению и абсолютно нетоксична. Молекулы
БЦ лежат строго параллельно друг другу. Поэтому образующиеся кристаллические
микрофибриллы в 100 раз тоньше микрофибрилл растительной целлюлозы, то есть это
структурные элементы наноуровневого размера (рис. 2, 3).
Рисунок
2 – Бактериальная целлюлоза (×20000)
Рисунок
3—
Растительная целлюлоза (×200)
Микрофибриллы
БЦ по одной через особые отверстия выдавливаются из клетки, где 10 – 100
микрофибрилл самопроизвольно объединяются в ленту. Множество лент переплетаются
в сеть, в которой запутываются бактерии, и все это в виде слизистой пленки
всплывает на поверхность. Толщина гель-пленки за месяц может дойти до 2,5
см.
Переплетение волокон образует
пористую губку, которая впитывает и долго удерживает огромное количество воды,
в 200 раз больше собственной массы. Кроме того, за счет правильного
расположения волокон степень кристалличности БЦ достигает 80%, и чтобы их
разорвать, нужно приложить силу до нескольких килограммов на квадратный
миллиметр.
Наиболее известным производителем БЦ
является уксуснокислая бактерия Gluconacetobacter xylinus. «Ксилинус»
по-гречески значит «древесная, хлопковая» (в данном случае это указывает на то,
что бактерия может образовывать целлюлозу).
БЦ также могут синтезировать
бактерии, образующие клубеньки на корнях растений и опухоли на стеблях. У
клубеньковых и опухолеродных бактерий БЦ может способствовать прикреплению
клеток к телу хозяина-растения. Возможно еще, что целлюлозная одежда спасает
клетки от ультрафиолетового излучения и, как кольчуга, защищает их от нападения
других микроорганизмов, а также от ядовитого воздействия металлов, например
меди. В мокром виде БЦ предохраняет бактерии от высыхания. В сухом виде она,
как парашют одуванчика, помогает им разлететься на далекие расстояния.
Благодаря своим особым свойствам БЦ
находит применение в технике, промышленности и медицине.
Бактериальную целлюлозу издавна
используют в пищевой промышленности. В Юго-Восточной
Азии и на островах Тихого океана широко распространены вегетарианские пищевые
продукты, которые готовят из растительного сырья (в первую очередь сои и риса)
с помощью бактерий и низших грибов. В частности, в условиях теплого, влажного
климата в растительном соке развивается сообщество уксуснокислых бактерий и
дрожжей. Оно образует на поверхности гель – пленку целлюлозы сантиметровой
толщины. В Индонезии и на Филиппинах этот студень режут на кубики, замачивают в
сахарном сиропе и едят как деликатес (ната-де-коко на кокосовом молоке и
ната-де-пино на ананасном соке) (рис. 4).
Рисунок 4 –
Пищевой продукт ната-де-коко
Во время Русско-японской войны 1905
г. в наши края был завезен чайный гриб – слоистый
коврик желтого цвета, плавающий на поверхности подслащенного чая. Сам он в пищу
не идет, но образует чайный квас. Вопреки своему названию, чайный гриб –
это
вовсе не особый гриб, а целлюлозная гель-пленка с включенными в нее клетками
уксуснокислых бактерий и нескольких видов дрожжей (рис. 5). Чайный квас
известен как прохладительный и тонизирующий напиток. Считается, что он обладает
лечебным действием.
Рисунок 5 – Чайный гриб
Бактериальная целлюлоза используется
в производстве пищевых продуктов для придания им волокнистой структуры или как
наполнитель. Известно, что полезно употреблять в пищу растительные волокна, так
как они стимулируют пищеварение и действуют в качестве адсорбента. Диетические
свойства БЦ в этом отношении выше, чем чистой растительной целлюлозы.
Микробная целлюлоза способна служить
заменой растительной целлюлозы, а внедрение бактериального способа получения
целлюлозы в будущем может уменьшить расход древесины на производство бумаги и
волокон (рис. 6).
Рисунок 6 – Бумага из
бактериальной целлюлозы
БЦ используется как медицинский
материал для лечения поверхностных ран. В отличие от синтетических полимеров,
БЦ является биологически совместимой, то есть она не наносит вреда
человеческому организму, не токсична, не вызывает аллергии и физического
отторжения. Плоская гель-пленка БЦ – это идеальная повязка при пересадке кожи,
лечении ран, послеоперационных швов и язв, а также гнойных воспалений,
потертостей и пролежней. Мы знаем, насколько трудно и мучительно излечиваются
такие повреждения, а ожоги третьей степени, затрагивающие большую часть
поверхности тела, чаще всего заканчиваются смертельным исходом. В клинических
испытаниях установлено, что гель-пленка БЦ творит чудеса. Это прочная, но
одновременно эластичная и комфортная повязка, хорошо прилегающая к пораженному
участку тела.
Благодаря гель – пленкам БЦ
восстанавливается кожный покров, из них можно делать протезы кровеносных
сосудов (рис. 7).
Рисунок 7 –
Кровеносные сосуды из бактериальной целлюлозы
Британские
дизайнеры уже предлагают одежду из бактериальной целлюлозы (рис. 8).
Рисунок
8 – Одежда из бактериальной целлюлозы
Методика исследования
Чайный
гриб выращивали в подслащенном чае при комнатной температуре с различной
концентрацией сахара (10, 20, 30 и 40%). Чистую культуру уксуснокислых бактерий
выращивали на питательной среде с мелом в термостате при температуре 30 °С. Гель-пленки
бактериальной целлюлозы получали на 7% растворе мелассы в открытых контейнерах
различной формы. Для изучения микроморфологии бактерий готовили фиксированные
микроскопические препараты. При окраске бактерий метиленовой синью на
предварительно обезжиренных и высушенных предметных стеклах делали мазки.
Препараты высушивали на воздухе, фиксировали над пламенем горелки и окрашивали
в течение 1-2 мин метиленовой синью, затем краситель смывали водой и препараты
высушивали на воздухе. Микроскопирование и фотографирование препаратов
осуществляли с помощью видеомикроскопа MC
100 (XP) (Micros, Австрия) (рис. 9).
Рисунок
9- Микроскоп Micros MC 100
Количество бактериальной целлюлозы
определяли весовым методом после ее высушивания при 105 °С до постоянной массы.
Результаты исследования
Первым этапом работы было изучение
состава чайного гриба и оптимизация условий его роста.
В исследуемом продукте обнаружены
палочковидные бактерии с круглыми концами: одиночные и в коротких цепочках,
прямые и слегка изогнутые (рис. 10). Также обнаружены дрожжи овальной формы.
Рисунок 11 – Бактерии и
дрожжи в чайном грибе
Дрожжи сбраживают сахар в спирт, а
уксуснокислые бактерии превращают его в уксусную кислоту. Максимальное
количество биомассы чайного гриба образовывалось в среде с 30% сахарозы.
На втором этапе работы изучались культурально-морфологические
свойства уксуснокислых бактерий, выделенных из чайного гриба. На агаризованной
среде с мелом бактерии образуют мелкие колонии диаметром 0,5-1
мм, белого цвета (рис. 12). Вокруг колоний наблюдаются зоны просветления
вследствие растворения мела уксусной кислотой.
Рисунок 12 – Колонии
уксуснокислых бактерий на среде с мелом
Культура представлена палочками с
закругленными концами, прямыми и слегка изогнутыми (рис. 13).
Рисунок 13 – Уксуснокислые
бактерии
На третьем этапе работы изучалось
образование гель-пленок БЦ чистой культурой уксуснокислых бактерий. Получены
гель-пленки БЦ на разведенной мелассе в количестве 1,53±0,01
г/л. Показано, что их форма зависит от формы используемых контейнеров (рис. 14,15).
Рисунок 14- Гель-пленка
БЦ в контейнере прямоугольной формы
Рисунок 15- Гель-пленка
БЦ круглой формы в колбе
Выводы
-В ходе проведенных исследований
изучен состав чайного гриба и условия его роста.
-Изучены свойства уксуснокислых
бактерий, выделенных из чайного гриба и образующих целлюлозу.
-Получены гель-пленки бактериальной
целлюлозы. Показано, что их форма зависит от формы используемых контейнеров.
Список использованных
источников
1. Пиневич А. В. Чудо - пленки, или
Слово о бактериальной целлюлозе. Весник Санкт-Петербургского университета.
2007. № 3. С. 33-39.
2. Лияськина Е.В., Ревин В.В., Грошев М.В., Лияськин Ю.К. Биотехнология
бактериальных экзополисахаридов. Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2010. 120 с.
3. Баклагина Ю.Г., Хрипунов А.К.,
Ткаченко А.А. и др. Сорбционные свойства бактериальной целлюлозы. Ж. прикл.
химии. 2005. T. 78. Вып.7. C. 1197-1202.
Оставьте свой комментарий
Авторизуйтесь, чтобы задавать вопросы.