Методическая разработка практического занятия по МДК.04.01 №31

Государственное автономное образовательное учреждение

среднего профессионального образования Республики Крым

«Евпаторийский медколледж»

План занятия (практическое) № 31

Тема занятия:     Проведение микробиологической диагностики  менингококковых и гонококковых  инфекций.  

Дисциплина(МДК):    04.01. Теория и практика  лабораторных микробиологических и иммунологических исследований

Специальность:   31.02.03. Лабораторная диагностика

Курс:                      2-ой

Цели занятия:

Образовательные:

·        Изучить методики выделения и идентификации менингококка и гонококка

·        Рассмотреть морфологические, культуральные, биохимические и серологические свойства менингококка и гонококка

·        Рассмотреть патогенез заболеваний, вызываемых менингококком и гонококком

Развивающие:

·         Развивать навыки самообразования, творческие способности студентов

·        Продолжить развитие учебно-интеллектуальных умений;

·        выделять главное и существенное

·        устанавливать причинно-следственные связи

Воспитательные:

·        продолжить формирование эволюционных представлений о развитии органического мира, передачи наследственного материала

·        воспитывать уважение к людям, науки, их достижениям

·        продолжить формирования умения работать в коллективе, принимать совместные решения

·        продолжить формирования здорового образа жизни

Междисциплинарные связи:

1.     Биология

2.     Физико-химические методы исследования и техника лабораторных работ

3.     Анатомия и физиология человека

4.     Гигиена

Внутридисциплинарные связи:

1.     Общая микробиология

2.     Иммунология

3.     Санитарная микробиология

Место проведения: лаборатория  407

Тип занятия:           практическое

Количество часов: 4 академических

Обеспечение занятия: мультимедийное оснащение, таблицы, слайды.

Литература:

     Основные источники:

2.                   1. Ф.К.Черкес, Л.Б.Богоявленская, Бельская Н.А. «Микробиология»

М: Альянс 2014г.

2. Камышева К.С. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии / Камышева К.С. – Ростов н/Д: Феникс, 2015. – 281 с.

Дополнительные источники:

1.         Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: в 2 т. /                                                                 под ред. В. В. Зверева, М. Н. Бойченко. – Том 1. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 448 с.

2.         Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований: учебник. Сбойчаков В.Б. 2011. – 608 с

3.         Медицинская и санитарная микробиология: учебное пособие для студентов высш. Мед. Учебн. Заведений/ А.А. Воробьев, Ю.С. Кривошеин, В.П. Широбоков – 3-е изд., стер. – М.: Издательский центр «Академия», 2008. – 464 с., л.цв. вкл.

 Интернет- ресурсы:

1.  МедУнивер – медицинский информационный портал для интересующихся… Общая микробиология. Meduniver.com

2.  Сайт http://rospotrebnadzor.ru/

Студент должен уметь:

1.     Проводить индикацию и идентификацию менингококковых инфекций

2.     Проводить индикацию и идентификацию гонококковых инфекций

Студент должен знать:

1.     Морфологию менингококков и гонококков

2.     Заболевания, вызываемые менингококками и гонококками

3.     Культуральные и биохимические свойства менингококков и гонококков

Студент должен обладать:

Общие компетенции

ОК 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый интерес.

ОК 2. Организовывать собственную деятельность, выбирать типовые методы и способы выполнения профессиональных задач, оценивать их эффективность и качество.

ОК 3. Принимать решения в стандартных и нестандартных ситуациях и нести за них ответственность.

ОК 4. Осуществлять поиск и использование информации, необходимой для эффективного выполнения возложенных на него профессиональных задач, а также для своего профессионального и личностного развития.

ОК 5. Использовать информационно-коммуникационные технологии в профессиональной деятельности.

ОК 6. Работать в коллективе и команде, эф­фективно общаться с коллегами, руководством, пациентами.

ОК 7. Брать ответственность за работу членов команды (подчиненных), за результат выполнения заданий.

ОК 8. Самостоятельно определять задачи профессионального и личностного развития, заниматься самообразованием, осознанно планировать и осуществлять повышение своей квалификации.

ОК 9. Ориентироваться в условиях  смены технологий в профессиональной деятельности.

ОК 10. Бережно относиться к историческому наследию и культурным традициям народа, уважать социальные, культурные и религиозные различия.

ОК 11. Быть готовым брать на себя нравственные обязательства по отношению к природе, обществу, человеку.

ОК 12. Оказывать первую медицинскую помощь при неотложных со­стояниях.

ОК 13. Организовывать рабочее место с соблюдением требований охраны труда, производственной санитарии, инфекционной и противопожарной безопасности.

ОК 14. Вести здоровый образ жизни, заниматься физической культурой и спортом для укрепления здоровья, достижения жизненных и профессиональных целей.

Профессиональные компетенции

ПК 4.1. Готовить рабочее место и аппаратуру для проведения ­ лабораторных микробиологических исследований.

ПК 4.2. Проводить лабораторные микробиологические и иммунологические исследования биологических материалов, проб объектов внешней среды и пищевых продуктов; участвовать в контроле качества.

ПК 4.3. Регистрировать результаты проведенных исследований

ПК 4.4. Проводить утилизацию отработанного материала, дезинфекцию и стерилизацию использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.

Структура занятия:

1.     Организационный момент                                                               2 мин.

2.     Мотивация (цели) занятия                                                               3 мин.

3.     Оценка знаний студентов (проверка исходного уровня знаний) 25 мин.

4.     Инструктаж самостоятельной работы студентов                          15 мин.

5.     Практическая часть                                                                          125 мин.

6.     Подведение итогов занятия, оценка работы студентов                 8 мин.

7.     Задание на дом                                                                                    2 мин.

 Ход занятия

1.                 Организационный момент

 (Приветствие, проверка присутствующих, внешнего вида студентов, сообщение темы, учебных целей занятия) 

Инструктаж по охране труда (роспись в журнале по технике безопасности)

Мотивация  (цели)  занятия:

Изучение методов выделения и идентификации менингококков и гонококков в связи с распространенностью заболеваний, является необходимым звеном в ходе освоения профессионального модуля Проведение лабораторных микробиологических и иммунологических исследований и являются неотъемлемой частью формирования компетентностного подхода в подготовке медицинского лабораторного техника.

ОК.1-ОК.14; ПК.4.1-4.4; 

Оценка знаний студентов (проверка исходного уровня знаний):

а) проверка знаний.

1. Каковы морфологические свойства менингококков?

2. На каких средах выращивают менингококки и какие условия необходимы для их размножения?

3. Какова биохимическая активность менингококков и их устойчивость во внешней среде?

4. Какие заболевания вызывают менингококки?

5. По какому антигену делят менингококки на серогруппы?

Гонококки:

1. Опишите морфологические свойства гонококков.

2. Каковы ферментативная активность и токсинообразование гонококков?

3. Какова устойчивость гонококков. К какому препарату гонококки особенно чувствительны?

4. Какие заболевания вызывают гонококки и их патогенез.

б) проверка внеаудиторной самостоятельной работы

таблицы, кроссворды, рисунки по темам.

в) подведение итогов контроля:

Оценивание, замечания по работе.

2.                 Практическая часть:

а) подготовка студентов к самостоятельной работе (проведение инструктажа по выполнению заданий):

Микробиологическое исследование

Цель исследования: выявление менингококка и определение его серогруппы.

Материал для исследования

1. Спинномозговая жидкость.

2. Отделяемое слизистой оболочки носоглотки.

3. Кровь.

Способы сбора материала

Способы сбора материала

Рис. 39. Взятие слизи из носоглотки для исследования на менингококки. 1 - шпатель; 2 - тампон для взятия материала

Основные методы исследования

1. Микроскопический.

2. Микробиологический.

3. Серологический.

Ход исследования

Ход исследования

Четвертый день исследования

Производят учет результатов (табл. 27)

Таблица 27. Дифференциация менингококков от непатогенных нейссерий

Примечание. + рост (положительная проба); - отсутствие роста; к - кислота.

Определение группы менингококка. После получения чистой культуры менингококка проводят серологическое определение группы. Для этого используют коммерческие агглютинирующие и преципитирующие сыворотки.

На предметное стекло наносят по одной капле неразведенных агглютинирующих сывороток групп А, В, С и др., каплю изотонического раствора натрия хлорида (контроль). К каждой капле прибавляют одну петлю выделенной культуры. Наличие агглютинации в одной из капель определяет группу выделенной культуры.

Для выявления серогрупп можно ставить реакцию преципитации в геле (см. главу 32).

В настоящее время с диагностической целью используют серологические методы диагностики: сыворотку обследуемых лиц исследуют в РНГА с менингококковым эритроцитарным диагностикумом А, С и других серогрупп.

Контрольные вопросы

1. Какой материал служит для выявления менингококков при заболевании менингитом?

2. Как транспортируют исследуемый материал?

3. Что прибавляют к собранному материалу для подавления роста грамположительных кокков?

4. От каких микроорганизмов необходимо дифференцировать менингококки, какие методы исследования проводят для дифференциации?

5. Какую реакцию ставят для определения серогруппы менингококков?

Задание

1. Подготовьте тампон, изогните его под углом 135° и возьмите друг у друга слизь из носоглотки. Посейте ее на агар с сывороткой.

2. Изучите под микроскопом мазок из культуры менингококка и зарисуйте его.

Питательные среды

Агар с сывороткой (см. главу 7).

Среда с линкомицином. К 80 мл расплавленного и остуженного до температуры 50° С 2% агара добавляют 20 мл лошадиной или бычьей сыворотки, 0,5-0,7 мл раствора линкомицина в рабочем разведении (рабочее разведение 0,001 мг на 1 мл среды). После перемешивания среду разливают в чашки Петри. Раствор линкомицина готовят на стерильной воде и сохраняют в холодильнике.

Микробиологическое исследование

Цель исследования: выявление гонококков и противогонококковых антител.

Материал для исследования

1. Отделяемое слизистой оболочки уретры у мужчин.

2. Отделяемое слизистой оболочки уретры и шейки матки у женщин.

3. Гнойные выделения из глаз.

4. Кровь для получения сыворотки.

Способы сбора материала

Способы сбора материала

Примечание. Для бактериоскопического и бактериологического исследования материал берут: 1) до начала лечения антибиотиками: 2) не ранее чем через 10 дней после окончания лечения антибиотиками; 3) не ранее чем через 2 ч после последнего мочеиспускания; 4) не ранее чем через 2 ч после спринцевания.

Основные методы исследования

1. Микроскопический (главным образом используется при острых формах).

2. Микробиологический.

3. Серологический.

Ход исследования

Первый день исследования

Первый день исследования

Второй день исследования

Вынимают посевы из термостата и просматривают их. Изучают колонии. Делают мазки. При наличии подозрительных грамотрицательных диплококков колонии пересевают на скошенную среду в пробирках (среда должна быть свежеприготовленной и содержать достаточное количество конденсата) и ставят пробу на оксидазу. Для этого пипеткой на колонию наносят каплю 1% раствора диметилпарафенилендиамина, колонии изменяют цвет от темно-коричневого до черного.

Третий день исследования

Вынимают посевы из термостата, делают мазки со скошенного агара, окрашивают по Граму и микроскопируют. Засевают на среды Гисса (лактозу, глюкозу, маннит и мальтозу). Эти углеводы должны содержать 30% сыворотки крови. Засеянные пробирки ставят в термостат.

Четвертый день исследования

Вынимают пробирки из термостата, при отсутствии роста оставляют их в термостате еще на 1-2 дня. При наличии роста учитывают результаты (табл. 28).

Таблица 28. Дифференциация гонококков от других нейссерий

Серологическая диагностика

Третья неделя заболевания. При хроническом течении заболевания и в сомнительных случаях ставят РСК с сывороткой больного (см. главу 12). В качестве антигена используют убитую культуру гонококков, которую готовят в производственных условиях. Можно применить реакцию непрямой гемагглютинации (см. главу 12).

Контрольные вопросы

1. Какой материал служит для выявления гонококков и каким способом его получают?

2. Через сколько времени после мочеиспускания (или спринцевания у женщин) можно брать материал для исследования?

3. Какой метод исследования является основным при острой форме и какой - при хронической форме гонореи?

4. Когда и какую серологическую реакцию ставят при подозрении на гонорею?

5. От каких микроорганизмов необходимо дифференцировать гонококки?

Задание

Получите у преподавателя препарат. Изучите его и зарисуйте гонококки, расположенные внутри лейкоцита и вне его при окраске по Граму.

Питательные среды

Желточная среда. К 100 мл МПА из кроличьего мяса добавляют 15 мл желтка (свежего куриного яйца), 6 мл индикатора фенолового красного, 1,5 мл сахара, растворенного в 1 мл стерильной дистиллированной воды.

Питательная среда асцит-агар. К фильтрату бульона, приготовленного из кроличьего мяса, добавляют 2% агар, 1% пептон и 0,5% хлорид натрия. Нагревают до растворения агара, устанавливают рН 7,4-7,5, подщелачивают 20% гидроксидом натрия. Среду доводят до кипения, фильтруют, разливают в стерильные флаконы и стерилизуют в автоклаве 15 мин при 115° С.

Рецепты безасцитных питательных сред (МПА рН 7,4-7,5).

1) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл

гидролизата казеина - 2 мл

дрожжевого аутолизата - 2 мл

сыворотки крови крупного рогатого скота - 20 мл

2) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл

5% раствор гемогидролизата - 2 мл

дрожжевого аутолизата - 2 мл

сыворотки рогатого скота - 20 мл

3) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл

желтка куриного яйца - 10 мл

сыворотки крови рогатого скота - 20 мл

Рост гонококков на этих средах обильный. Колонии гонококка могут быть выявлены с помощью пробы на оксидазу, при которой они окрашиваются в красный цвет, переходящий в черный.

б) самостоятельная работа студентов:

1.     провести посев гнойного отделяемого или мазков из носоглотки  на ЖСА и кровяной агар

2.     зарисовать схему выделения чистой культуры стафилококков

3.     Сделать выводы  

в) подведение итогов самостоятельной работы

Оформление в рабочей тетради выводов о проделанной работе

 Итоговый контроль 

Решение ситуационных задач (см.приложение №1)

Проверка преподавателем работ студентов

3.                 Задание на дом

Подготовка по теме «Стрептококки»

Подведение итогов занятия, оценка работы студентов

Преподаватель оценивает работу студентов, корректирует ошибки, отвечает  на вопросы студентов

Преподаватель  Гончарова А.И.

Приложение №1

Задача №48. Больной обратился к врачу с симптомами острого гнойного уретрита, появившегося через 3 дня после полового акта.

1) Какие микроорганизмы могли вызвать это заболевание?

2) Как доказать этиологию заболевания?

Ответ к задаче №48:

1) Гонококк.

2) Микроскопический метод (обнаруживается незавершенный фагоцитоз диплококков при окраске метиленовым синим), бактериологический метод.

Краткое описание документа:

Методическая разработка практического занятия по МДК.04.01 Теория и практика лабораторных микробиологических и иммунологических исследований предназначена для проведения практического занятия по разделу "Частная микробиология" на 2-ом курсе отделения Лабораторная диагностика и включает цели, требования к знаниям и умениям студентов, а также подробное описание техники микробиологического исследования.