Проведение пробы на совместимость крови донора и реципиента

• 1 слайд

  Отделение
  трансфузиологии и переливания крови
  
  Заведующая отделением
  Ефремова О.М.
  
  Проведение пробы на совместимость крови донора и реципиента
  
  Государственное бюджетное учреждение здравоохранения
  "Челябинская областная клиническая больница"
  

• 2 слайд

  
  Определение групповой принадлежности крови по системе АВ0 при помощи цоликолонов анти-А, анти-В, анти-АВ
  
  

• 3 слайд

  Оборудование и инвентарь
  Плоскость светлая со смачиваемой поверхностью.
  Скарификатор.
  Стеклянная палочка.
  Песочные часы на 3 минуты.
  Марлевая салфетка.
  Сырье и материалы
  Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ.
  Капиллярная кровь.
  Изотонический раствор NаCl (физиологический раствор).
  

• 4 слайд

  Флаконы с Цоликлонами анти-А, анти-В, анти-АВ поставить в штатив слева на право в данном порядке.
  Поставить в штатив флакон с изотоническим раствором NаCl.
  .
  Провести забор капиллярной крови стерильным одноразовым скарификатором на плоскость
  Проводить исследование при температуре от плюс 15 до плюс 25 0С.
  На верхнем крае плоскости указать фамилию и инициалы обследуемого.
  Процедура
  

• 5 слайд

  На плоскости надписать анти-А, анти-В, анти-АВ.
  На плоскость под соответствующими надписями нанести по одной большой капле (0,1мл) Цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ.
  Рядом с каждой каплей Цоликлонов нанести по одной маленькой капле (0,01мл) исследуемых эритроцитов. Соотношение Цоликлонов к эритроцитам - 10:1.
  Цоликлоны и эритроциты в каждой капле перемешать стеклянной палочкой, вытирая её после каждого перемешивания.
  Плоскость периодически покачивать.
  Наблюдать за ходом реакции с Цоликлонами в течение 3 минут.
  Процедура
  

• 6 слайд

  Контрольное исследование
  На плоскость нанести большую каплю (0,1мл) физиологического раствора.
  Рядом нанести каплю (0,01мл) исследуемых эритроцитов.
  Перемешать, результат реакции оценить через 3 минуты.
  Учет результата
  Результат реакции оценить через 3 минуты.
  Результат оценить визуально по наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов. Положительный результат - наличие агглютинатов (склеенных эритроцитов) на фоне обесцвеченной жидкости. Отрицательный результат – равномерно окрашенные капли в красный цвет.
  

• 7 слайд

  Группы крови
  АВ (IV) Ph +
  0 (I) Ph -
  А (II) Ph +
  В (III) Ph +
  

• 8 слайд

  Если Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ дали отрицательную реакцию, это указывает на отсутствие групповых антигенов. Значит, исследуемая кровь принадлежит к группе 0(I).
  Если Цоликлоны анти-А и анти-АВ дали положительную реакцию, а Цоликлон анти-В – отрицательную, это указывает на наличие антигена А. Значит, исследуемая кровь принадлежит к группе А(II).
  Если Цоликлоны анти-В, анти-АВ дали положительную реакцию, а Цоликлоны анти-А – отрицательную, это указывает на наличие антигена В. Значит, исследуемая кровь принадлежит к группе B(III).
  

• 9 слайд

  Если Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ дали положительную реакцию, это указывает на наличие антигенов А и В. Можно предположить, что кровь принадлежит к группе АВ(IV).
  Для исключения неспецифической агглютинабельности исследуемых эритроцитов необходимо провести дополнительный контроль с физиологическим раствором. Отсутствие агглютинации в этой капле позволяет считать реакцию специфичной и отнести кровь к группе АВ(IV).
  

• 10 слайд

  
  Первичное определение резус-принадлежности крови человека цоликолоном анти-D супер
  
  

• 11 слайд

  Оборудование и инвентарь
  Плоскость светлая со смачиваемой поверхностью.
  Стеклянная палочка.
  Песочные часы на 3 минуты.
  Марлевая салфетка.
  Сырье и материалы
  Цоликлон анти-D супер.
  Капиллярная кровь.
  

• 12 слайд

  Проводить исследование при температуре 15- 25О С.
  На верхнем крае плоскости указать фамилию и инициалы обследуемого.
  На плоскость нанести большую каплю реагента (0,1мл) и маленькую каплю 0,05 исследуемой крови (т.е. соотношение 2:1.,3:1).
  Цоликлоны и эритроциты перемешать стеклянной палочкой.
  Плоскость рекомендуется покачивать не сразу , через 20-30 секунд.
  Наблюдать за ходом реакции в течение 3 минут. При наличии агглютинации - определяемая кровь резус-положительная. При отсутствии агглютинации (равномерное розовое окрашивание) - определяемая кровь резус-отрицательная.
  Процедура
  

• 13 слайд

  В сухую чистую 10мл пробирку берется 3 мл эритромассы из гемакона, добавляется 3 мл 0,9% физиологического раствора
  Центрифугируется 5-10минут при 1500-2000 оборотов
  Оценка результата:если надосадочный слой имеет розовое окрашивание , проба положительная, такую кровь переливать нельзя
  Проба на скрытый гемолиз
  

• 14 слайд

  
  Проведение пробы на совместимость крови донора и реципиента по системе АВ0
  
  

• 15 слайд

  Плоскость светлая со смачиваемой поверхностью.
  Стеклянная палочка.
  Песочные часы на 5 минут.
  Марлевая салфетка.
  Оборудование и инвентарь
  

• 16 слайд

  Сыворотка крови пациента в пробирке.
  Эритроциты донора из пластикового контейнера с эритроцитсодержащей трансфузионной средой.
  Изотонический раствор NаCl (физиологический раствор).
  Сырье и материалы
  

• 17 слайд

  Проба производится в течение 5 минут, на плоскости, при комнатной температуре.
  На плоскости надписать фамилию, инициалы и группу крови больного, фамилию, инициалы и группу крови донора и номер контейнера с кровью.
  На плоскость накапать 2-3 капли сыворотки больного.
  Туда же добавить маленькую капли крови донора так, чтобы соотношение крови и сыворотки было приблизительно 1:10 (для удобства рекомендуется сначала спустить через иглу несколько капель крови донора на борт пластинки, а затем оттуда концом сухой стеклянной палочки перенести маленькую каплю крови для перемешивания с сывороткой больного).
  Кровь размешать с сывороткой сухой стеклянной палочкой.
  Плоскость слегка покачать, затем на 1-2 минуты оставить в покое и снова периодически покачивать, одновременно наблюдая за ходом реакции в течение 5 минут.
  Процедура
  

• 18 слайд

  
  Результат реакции оценить через 5 минут.
  Результат оценить визуально по наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов.
  
  Если в смеси больного и крови донора наступила агглютинация эритроцитов - агглютинаты видны сначала в виде мелких, затем крупных комочков на фоне полностью или почти полностью обесцвеченной сыворотки - кровь донора несовместима с кровью больного и не должна быть ему перелита.
  Если смесь крови донора и сыворотки больного по истечении 5 минут остается гомогенно окрашенной, без признаков агглютинации - кровь донора совместима с кровью больного в отношении групп крови системы АВ0.
  Оценка результата
  

• 19 слайд

  
  Контрольное исследование
  Если при микроскопии видны не агглютинаты из эритроцитов, а «монетные столбики» необходимо повторить пробу.
  Добавить в смесь сыворотки реципиента и эритроцитов донора 2-3 капли изотонического раствора NaCl.
  Подогреть до 37ºС .
  Результат оценить визуально при микроскопии.
  Оценка результата
  Если «монетные столбики» расходятся и эритроциты располагаются в виде гомогенной взвеси - кровь донора совместима в отношении групп крови системы АВ0.
  

• 20 слайд

  
  Проведение пробы на совместимость крови донора и реципиента по системе Резус с применением 10% раствора желатина
  
  

• 21 слайд

  Оборудование и инвентарь
  Пробирка емкостью не менее 10 мл.
  Водяная баня.
  Песочные часы на 15 минут.
  Лупа.
  Пипетка.
  Штатив для пробирок.
  Марлевая салфетка.
  Сырье и материалы
  Сыворотка крови пациента в пробирке.
  Эритроциты донора из пластикового контейнера с эритроцитсодержащей трансфузионной средой.
  Изотонический раствор NаCl (физиологический раствор).
  

• 22 слайд

  Проба производится в пробирке при температуре 46-48 Сº в течение 15 минут.
  Достать из холодильника раствор желатина 10%.
  Произвести макроскопическую оценку раствора желатина 10%.
  Если раствор желатина 10% расценен как годный для применения, подогреть на водяной бане до разжижения.
  На пробирке надписать фамилию, инициалы и группу крови больного и донора, и номер контейнера с трансфузионной средой.
  Выпустить из контейнера через иглу несколько капель крови донора в другую сухую чистую пробирку, а затем оттуда при помощи пипетки перенести одну маленькую каплю эритроцитов донора на дно пробирки.
  Процедура
  

• 23 слайд

  Накапать в пробирку с эритроцитами две капли подогретого до разжижения раствора желатина 10%.
  Добавить 1-2 капли сыворотки больного.
  Содержимое пробирки перемешать путем встряхивания и поместить в штативе в водяную баню при температуре 46-48 Сº на 15 минут.
  После инкубации долить в пробирку 5-8 мл изотонического раствора NaCl.
  Содержимое пробирки перемешать 1-2 кратным перевертыванием её.
  Просмотреть на свет невооруженным глазом и затем путем микроскопирования.
  Процедура
  

• 24 слайд

  
  Результат реакции оценить через 15 минут.
  Результат оценить визуально по наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов.
  
  Если в пробирке наблюдается агглютинация эритроцитов - эритроциты видны в виде взвеси мелких, реже крупных комочков на фоне просветленной или полностью обесцвеченной жидкости - это значит, что кровь донора несовместима с кровью больного и не должна быть ему перелита.
  Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным и в нем не наблюдается каких-либо признаков агглютинации, это значит, что кровь донора совместима с кровью реципиента.
  Оценка результата
  

• 25 слайд

  
  ПРОВЕДЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ПРОБЫ
  
  

• 26 слайд

  Биологическая проба проводится посредством однократного переливания 10 мл компонентов крови со скоростью 2-3 мл (60 капель) в минуту - в течение 3-3,5 минут.
  После этого переливание прекращается и в течение 3 минут осуществляется наблюдение за состоянием реципиента, контролируется его пульс, число дыхательных движений, артериальное давление, общее состояние, цвет кожи, измеряется температура тела.
  Данная процедура повторяется дважды. При появлении в этот период клинических симптомов: озноб, боли в поясничной области, чувство жара и стеснения в груди, головной боли, тошноты или рвоты, врач, проводящий трансфузию компонентов крови, немедленно прекращает трансфузию.
  Биологическая проба выполняется, в том числе, и при экстренной трансфузии компонентов крови.
  Проведение биологической пробы
  

• 27 слайд

  Документация
  

• 28 слайд

  Протокол трансфузии
  

• 29 слайд

• 30 слайд

• 31 слайд

  БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ !