Сложные методы окраски капсул и зерен волютина. Прижизненное изучение микроорганизмов.

• 1 слайд

  Сложные методы окраски капсул и зерен волютина. Прижизненное изучение микроорганизмов.
  Практическое занятие №6
  

• 2 слайд

• 3 слайд

• 4 слайд

• 5 слайд

• 6 слайд

  Окраска по Бурри - Гинсу (выявление капсулы)
  Этот метод назван негативным, так как окрашивается фон препарата и бактериальная клетка, а капсула остается неокрашенной.
  1. На предметное стекло наносят каплю черной туши, разведенной в 10 раз. В нее вносят каплю культуры. Ребром шлифовального стекла делают мазок, так же как мазок крови, и высушивают.
  2. Фиксируют химическим способом спиртом или сулемой. Осторожно промывают водой.
  3. Окрашивают фуксином Пфейффера 3-5 мин (1-2 мин). Осторожно промывают и высушивают на воздухе.
  Внимание! Фильтровальной бумагой не пользоваться, чтобы не повредить препарат.
  Микроскопируют с помощью иммерсионной системы. Фон препарата черный, клетки - красные, капсулы – неокрашенные.
  

• 7 слайд

• 8 слайд

  Прижизненная окраска микроорганизмов
  Для изучения живой культуры используют чаще всего метиленовый синий и другие красители в больших разведениях (1:10000). Каплю исследуемого материала смешивают на предметном стекле с каплей красителя и накрывают покровным стеклом. Микроскопируют с помощью объектива 40×
  

• 9 слайд

  
  Изучение подвижности микроорганизмов
  
  Для исследования используют культуру бактерий, выращенных в жидкой питательной среде, или взвесь бактерий в изотоническом растворе натрия хлорида.
  

• 10 слайд

  Метод раздавленной капли
  На предметное стекло наносят пипеткой каплю культуры и покрывают ее покровным стеклом. Чтобы не образовывалось пузырьков воздуха, покровное стекло подводят ребром к краю капли и резко опускают его. Для предохранения препарата от высыхания его помещают во влажную камеру.
  Влажная камера представляет собой чашку Петри, на дне которой находится влажная фильтровальная бумага. На бумагу кладут две спички и на них помещают препарат. Чашку закрывают крышкой.
  Микроскопируют при увеличении объектива 40х в темном поле.
  

• 11 слайд

  Метод раздавленной капли
  

• 12 слайд

  Метод висячей капли
  Для приготовления препарата необходимы стекло с лункой, покровное стекло и вазелин.
  Края лунки покрывают тонким слоем вазелина.
  На покровное стекло наносят каплю культуры.
  Затем осторожно накрывают покровное стекло стеклом с лункой так, чтобы капля оказалась в центре.
  Склеившиеся стекла быстро переворачивают покровным стеклом вверх. Капля находится в герметической камере и сохраняется долгое время. При микроскопии сначала при малом увеличении (8×) находят край капли, а затем проводят изучение препарата при большом увеличении.
  

• 13 слайд

  Препарат висячая капля
  1-2 Нанести капли бактериальной взвеси пипеткой на покровное стекло
  3. Смазать края лунки осторожно вазелином. Сверху накрыть покровным стеклом с лункой. Перевернуть препарат вверх покровным стеклом
  

• 14 слайд

  Задание
  1. Возьмите готовые препараты, изучите их и зарисуйте основные формы микроорганизмов.
  2. Приготовьте мазки из различного материала (культуры, гноя, крови, мазки-отпечатки).
  3. Окрасьте препараты сложными методами (по Граму, Цилю - Нильсену, Ожешко, Бурри - Гинсу)