Методические указания к выполнению лабораторной работы "Свойства фотосинтетических пигментов. Разделение пигментов по методу Крауса"

Лабораторная работа № 2

СВОЙСТВА ФОТОСИНТЕТИЧЕСКИХ ПИГМЕНТОВ.

РАЗДЕЛЕНИЕ ПИГМЕНТОВ ПО МЕТОДУ КРАУСА

Цель работы: разделить и изучить свойства фотосинтетических пигментов при помощи метода Крауса

Оборудование: листья растений, спирт этиловый 96%, петролейный эфир (бензин), пробирки, ступка/пестик фарфоровые, фильтры обеззоленные, фильтровальные воронки.

Теоретическое введение

Метод Краусса. Метод основан на различной растворимости пигментов в органических растворителях (спирте и бензине) с разной полярностью.

Пример:

Неполярные растворители                                                                     Полярные растворители

Петролейный эфир                                                                                      Ацетон

       Бензин                                                                                    Спирты (этиловый, глицерин)

       Бензол                                                                                                      Вода

  Масла, жиры                                                                                  Карбоновые кислоты

   Дихлорэтан                                                                                      Простые эфиры и др.

К пигментам, участвующим в процессе фотосинтеза, относятся, прежде всего хлорофиллы a,b, каротиноиды и ксантофиллы. Сродство пигментов к полярным и неполярным растворителям определяется степенью их полярности. Ксантофиллы, содержащие две и более полярных групп, хорошо растворимы в спирте, в то время как каротин отличается более высоким сродством к петролейному эфиру (бензину). Химическое строение хлорофилла также, как и каротинам, позволяет их молекулам растворяться в неполярных растворителях.

Ход работы

Опыт 1. Приготовление спиртовой вытяжки пигментов.

Возьмите 2-3 листа растения  и с помощью ножниц измельчите её в фарфоровую ступку. Добавьте небольшое количество этилового спирта (1-2 мл) и разотрите измельченные листья в ступке. К растертой смеси пигментного материала прилейте еще 3-4 мл спирта и размешайте. Полученную вытяжку отфильтруйте в пробирку с помощью обеззоленного фильтра. Сравните цвет полученных вытяжек на луче проходящего света, сделайте вывод.

Опыт 2. Разделение пигментов по методу Краусса.

Разделение пигментов будет зависеть, как сказано выше, от частичной растворимости того или иного пигмента в спирте или бензине.

В чистую пробирку отлейте 2-3 мл спиртовой вытяжки. Прилейте 3 мл бензина и несколько капель воды. Пробирку несколько раз встряхнуть и дать постоять 3 минуты для перехода пигментов в нужную фазу. Наблюдайте разделение слоев (фаз). Сравните все полученные фазы и запишите результаты сравнения в таблицу. Сделайте вывод.

Таблица «Разделение пигментов»

Слой	Цвет	Состав пигментов	Спектр поглощения	Примечание

Приложение 1. Спектр поглощения пигментов