Презентация по химии на тему "Синтез олигонуклеотидов"

Синтез олигонуклеотидов

Олигонуклеотиды представляют собой соединения, состоящие из небольшого количества остатков нуклеотидов, соединённых фосфодиэфирной связью. Автоматические синтезаторы позволяют получать олигонуклеотиды длиной до 200 оснований. Олигонуклеотиды, построенные из дезоксинуклеотидов, часто используются в полимеразной цепной реакции (ПЦР) и известны как праймеры.

Химическое строение олигодезоксирибонуклеотидов (R = H) и олигорибонуклеотидов (R = OH)

Автоматический синтезатор олигонуклеотидов

Синтез олигонуклеотидов — это химический синтез относительно коротких фрагментовнуклеиновых кислот с заданной химической структурой (последовательностью). Метод применяется в современной лабораторной практике для получения олигонуклеотидов нужной последовательности быстрым и недорогим способом.

Наиболее распространённый способ синтеза олигонуклеотидов  основан на использованииамидофосфитов — строительных блоков, которые являются реакционноспособными производными дезоксирибонуклеозидов (dA, dC, dG, T) или рибонуклеозидов (A, C, G, U) и позволяют синтезировать короткие фрагменты ДНК и РНК соответственно. Применяются также и другие амидофосфиты, позволяющие вводить в цепь продукта модифицированные нуклеозиды, различные метки и функциональные группы. В ходе синтеза эти реагенты поочерёдно, в порядке, задаваемом последовательностью целевого продукта, присоединяют к растущей на твердофазном носителе цепи . Этот процесс был полностью автоматизирован в конце 1970-х годов и в настоящее время выполняется в специальных синтезаторах, управляемых компьютерами.

После завершения синтеза олигонуклеотид отделяют от носителя, удаляют защитные группы, использовавшиеся во время синтеза и очищают полученный продукт при помощи электрофорезаили ВЭЖХ .

Синтетические олигонуклеотиды находят широкое применение в молекулярной биологии и медицине, например, как антисмысловые олигонуклеотиды, праймеры для секвенирования иамплификации ДНК, зонды для определения комплементарных последовательностей ДНК и РНК, инструменты для нацеленного введения мутаций и сайтов рестрикции, а также для синтеза искусственных генов.